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萄酒中赭曲霉素A测定的方案设计

萄酒中赭曲霉素A测定的方案设计

本设计是建立了一种简便、高效、快速、耗费成本低的方法测定葡萄酒中的赭曲霉素 A 的高效液相的检测方法,来对我国葡萄酒中的赭曲霉素 A 进行了测定。

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  • 详细描述

    萄酒中赭曲霉素A测定的方案设计
    赭曲霉素 A 本身具有酸性,且易离子化,现今用于测定其方案有很多,主要有 TCL 法,ELISA 法,LC-MS-MS 法,HPLC-FD 法等。TCL 法为定性或半定量方法,检测周期长,重现性和灵敏度差。ELISA 法比较常用,灵敏度较高, 简单,但是检测的时候假阳性率比较高。超高效液相色谱-质谱联用法的优点为: 耗费时间短且效率高;缺点为:耗费的成本较高。而 HPLC-FD 技术测定结果准确度高,灵敏度高,而且同时可以检测多种不同的真菌毒素。所以,本方案利用HPLC-FD 法来测定葡萄酒中 OTA 的含量[13]。
     
    目录
    1设计背景 3
    1.1赭曲霉素 A 的介绍 3
    1.1.1赭曲霉素 A 的理化性质 3
    1.1.2赭曲霉素 A 的产生过程 3
    1.2常用的测定方法介绍 4
    1.2.1薄层层析法(TCL) 4
    1.2.2酶联免疫吸附法(ELISA) 4
    1.2.3免疫亲和层析净化高效液相色谱法 5
    1.2.4高效液相色谱法 5
    2方案设计 7
    2.1设计理论依据 7
    2.2仪器和试剂的设计 7
    2.2.1试剂、材料 7
    2.2.2主要仪器 7
    2.3测定步骤设计 8
    2.3.1色谱条件 8
    2.3.2前处理方式 8
    2.3.3标准曲线的绘制 9
    2.3.4酒样中 OTA 含量的测定 10
    2.4方法优化设计 11
    2.4.1固相萃取上样体积的选择 11
    2.4.2洗脱液具体用量的选择 12
    2.5方法评价设计 12
    2.5.1加标回收率 12
    2.5.2方法精密度 13
    3设计小结 15
    致 谢 16
    参 考 文 献 17
     
    参 考 文 献
    [1]康健,钟其顶,张辉,熊正河等.葡萄酒中赭曲霉素 A 的研究进展.酿酒,2009,(3):14-18.
    [2]康健.葡萄酒中赭曲霉素 A 的研究.天津科技大学,2009,70.
    [3]汪昭贤.兽医真菌学[M].西北农林科技大学出版社.2006.
    [4]Fernades A, Venancio A, Moura F, et al. Fate of ochratoxin A during a vinification trail[J]. Aspects of Applied Biology, 2003, 68: 73-80.
    [5]GB5009.96-2003,《谷物和大豆中赭曲霉素 A 的测定》[S].
    [6]Battilani P, Giorni P, Pietri A. Role of cultural factors on the content of ochratoxin A in grape[J]. Journal of Plant Pathology,2001,83:231-231.
    [7]孙慧兰,牛钟相,黄化成.赭曲霉毒素 A、B 的提取、分析与鉴定[J]. 山东农业大学学报,1999,1(20):1-5.
    [8]时瑾,黄飚,孙蔚榕,等.ELISA 法检测赭曲霉毒素 A 的改进研究[J]. 食品科学,2007,28(8):425-428.
    [9]江涛,李凤琴,王环宇,等.赭曲霉毒素 A 免疫学检测方法的研究[J]. 中国公共卫生,2004,20(5):556-558.
    [ 10 ] Beatriz Prieto-Sim' on, M'onica Camp'as, Jean-Marty, et al. Highly-performing immunosensor-based strategy for ochratoxin A detection in wine samples[J]. Biosensors and Bioelectronics. 2008, 23: 995-1002.
    [11]张艺兵,鲍蕾,褚庆华.农产品中真菌毒素的检测分析[M].北京:化学工业出版社.2006.
    [12]周天(摘译),李琦(校).利用荧光液相色谱法和羟基乙酸铅作为净化剂测定啤酒中的赭曲霉毒素 A[J].啤酒科技,2006,3:49-52.
    [13]梁桂娟.高效液相色谱-荧光检测法检测大米中赭曲霉毒素 A.中国酿造,2015,06.
    [14]魏文忠.免疫亲和柱技术在粮油卫生安全检测中的应用研究[J].粮食科技与经济,2014,03.
    [15]刘玉芳.高相液相色谱法测定谷物及其制品中赭曲霉毒素 A.现代农业科技,2009,06.
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