苏ICP备112451047180号-6
黄精中多糖及皂苷的分离提纯工艺研究
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摘要：黄精多糖与黄精皂苷是黄精的两个重要组分，具有多种药理活性，历年来人们研究的比较多。为了有效分析这两种成分的结构与药理活性，需建立廉价易行的分离提纯方法并设计合理简单的检测手段。本文在传统水提的基础上，使用中试放大提取黄精多糖，运用改良后的Sevag法除去蛋白及其他杂质，选用大孔树脂AB-8进行分离，高效凝胶色谱法作为分级依据。本文还提取了黄精中的皂苷，用比色法检测皂苷含量，用大孔树脂进行分离，薄层色谱法作为分级依据。结果发现中试提取方法能有效提高黄精多糖的提取率，增大了提取量。通过对黄精提取物的纯化，使其多糖含量高达98.7%，且不含蛋白质、核酸等杂质。大孔树脂AB-8有效分出了黄精多糖中两个分子量相对均一的多糖PSP-1，PSP-2。黄精皂苷采用70%乙醇提取，再利用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取达到除杂的目的，该提取方法得到的黄精总皂苷的纯度为67.6%。黄精皂苷的分离方法与黄精多糖类似，也能被大孔树脂AB-8分开，最终能得到含量较高且较纯的三种组分。
关键词：黄精 多糖 皂苷 分离
Study on the isolation and Purification of polysaccharides and saponin from polygonatum sibiricum
Abstract Polysaccharide and saponin are two important components of polygonatum sibiricum Red., they both have various pharmacological activities. They have been studied for a lot of years. In order to analyze the structure and pharmacological activity of these two components effectively, a cheap and convenient method of isolation and purification should be built. What’s more, a reasonable and simple detection means should be designed. On the base of traditional method such as water-extract, pilot-plant test has been used. Improved Sevag method was used to remove the inpurty, the macroporous absorption resin(AB-8) was used to isolate, HPLC was used to detect. In this article, polygonatum sibiricum Red. saponin was also been extracted. We used colorimetric method to calculate the content of saponin. the macroporous absorption resin(AB-8) was used to isolate too, and the TLC method was used to detect. Finally, Pilot-plant test have improved not only the extraction rate of Polysaccharide but also the extraction amount.of polygonatum sibiricum Red. After purified, Researches has obtained the polysaccharide content about 98.7%. What’s more, there is no protein and nucleic acid in the polygonatum sibiricum Red extractive. Water extracts of P. sibiricum Red.was separated by macroporous absorption resin(AB-8), two single polysaccharide, which named PSP-1 and PSP-2, have been separated. Polygonatum sibiricum Red.saponin was extracted by 70%(v/v) concentration of ethanol, then extracted by petroleum ether, ethyl acetate and n-butyl alcohol successively. The purity of total saponin is 67.6% in this way. The method of separation is similar to polygonatum sibiricum Red Polysaccharide’s, which also uses the macroporous absorption resin(AB-8). The steroidal sapogenin mainly distributed in three groups.
Key words: Polygonatum sibiricum polysaccharide saponin isolation
目录
引言 1
第一章 综述 1
1.1黄精多糖综述 1
1.1.1生理活性 1
1.1.2研究概况 1
1.1.3提取方法概述 2
1.1.4纯化 4
1.1.5多糖分离 6
1.1.6多糖性质鉴定 7
1.1.7多糖纯度鉴定 7
1.1.8多糖含量测定 7
1.1.9多糖的分子量测定 7
1.2黄精皂苷综述 8
1.2.1生理活性 8
1.2.2研究概况 8
1.2.3提取过程概述 8
1.2.4纯化 9
1.3总结与展望 10
第二章 黄精多糖与黄精皂苷的分离纯化 10
2.1黄精多糖的分离纯化 10
2.1.1材料与仪器 10
2.1.2实验方法 11
2.1.3结果与讨论 16
2.2黄精皂苷的初步研究 23
2.2.1材料与仪器 23
2.2.2实验方法 23
2.2.3结果与讨论 25
2.2.3.1提取率 25
结论 27
致谢 28
参考文献 29
引言
本文所用的材料为黄精，最早记载于《名医别录》[1]，享有“仙人余粮”、“救命草”等美誉。在中国史籍上，黄精从2000多年前就被发现和使用[2]。由于其在民间的药用很广，约有十多余种，故而药典里收录了常见的三种植物为其原生药：黄精（P.sibiricum Red）、滇黄精（P.kingianum ColletHemsl）和多花黄精（P.cyrtonema Hua）。黄精味甘、性平，具备滋润心肺、养阴补气、补肾止寒等功效[3]，久服神清气爽，延年益寿。
黄精中重要的化学组分有：多糖[4]、强心苷[5]、木脂素[6]、甾体皂苷[7]、蒽醌类化合物[8]、氨基酸[9]、黄酮[10]及生物碱[11]等，而多糖和皂苷是黄精活性物质的代表成分。
结论
在进行黄精多糖相关的研究时发现，通过引入中试放大装置能够显著提高黄精多糖的提取率，同时最后的提取总量随着开始加入物料的增多也提高了很多，这可能和黄精粉末放入中式放大提取罐后，与溶剂的接触面积提高了，使黄精粉末与溶剂接触更充分，受热更均匀持久等有关。在选用合适的除杂方法后，使得黄精多糖的纯度满足实验要求。而利用大孔树脂AB-8作为柱材料进行柱层析分离黄精多糖是前人尚未采用过的一种方法，用此方法从已经纯化的黄精精制多糖中分离获得了两个分子量相对均一的组分，它们分别是PSP-1，PSP-2，按照分子量先大后小的洗脱顺序，黄精多糖这两个组分在大孔树脂AB-8中先后被洗脱出来。本文还对黄精中皂苷的含量进行了测定，发现较之黄精多糖，皂苷的提取率不高，含量也只有67.6%。但黄精皂苷也可通过大孔树脂AB-8进行有效筛分。为今后比较黄精多糖和皂苷的药效提供了方法和物质基础。结论
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