低温冷榨花生粕蛋白酶解条件响应面优化

低温冷榨花生粕蛋白酶解条件响应面优化

摘要

本试验利用了碱性蛋白酶对低温冷榨花生粕进行限制性酶解并应用了响应面优化技术进行了工艺条件的优化。首先，应用了Min Run Equirelicated Res IV设计考察了酶浓度、酶解温度、酶解时间、底物浓度与酶解系统pH等因素对酶解液的多肽含量、水解度和蛋白质含量的影响，并筛选了几个主效因子。随后进行了爬陡坡试验，使所有主效应因子同时向最优化方向逼近。在爬陡坡试验结果的基础上进行了3因素5水平中心复合设计的响应面优化并获得最佳酶解条件，即酶浓度4325U，底物浓度10.20%，反应时间85min，其它条件为反应温度为50℃，反应pH9.0。验证试验结果为0.223±0.0005，与预测值接近。

关键词:花生粕；酶法水解；响应面优化；碱性蛋白酶

Coid pressed peanutmeal by enzymatic hydrolysis conditions of response surface optimization

Abstract

The test for low temperature cold pressed peanut meal by enzymatic hydrolysis and oxidation conditions response surface optimization. Take Min Run Equirelicated Res IV design study of alkaline protease enzymolysis concentration, reaction temperature, reaction time, substrate concentration, enzyme reaction of peanut meal pH and other factors on cold pressed peanut meal polypeptide content, degree of hydrolysis, protein content affects the main effect factors were statistically screening, then underwent a steep hill climbing test, so that all the main effect factor at the same time to the optimization direction of approximation, the oxidation conditions to optimization direction changes, the influence of 3 factors and 5 levels significantly by two return of digital model for optimization, data regression fitting, can find the factors influencing a, two and the interactive effect of correlation equations and can draw a contour map, finally descending dimension analysis, optimum enzymolysis conditions: the optimum enzymolysis conditions for enzyme concentration 4325U, substrate concentration 10.20%, reaction time 85min, other conditions as the reaction temperature is 50℃, reaction pH9.0, polypeptide content on model for three or more experimental verification, the measured peptide content is 0.223± 0.0005, and the predicted values are close to. Description of response surface analysis to get optimal solution conditions and forecast result accords with the fact

Key words: peanut meal; enzymatic hydrolysis; response surface optimization; alkaline protease

1 引言 1

1.1 花生及花生粕资源概况 1

1.1.1 花生资源概述 1

1.1.2 花生粕资源概况 1

1.2 花生粕及花生蛋白的组成及营养 2

1.2.1 花生粕的组成及营养 2

1.2.2 花生蛋白的组成及营养 2

1.3 花生粕和花生蛋白的用途及发展 4

1.3.1 花生粕的用途 4

1.3.2 花生蛋白的应用 5

1.4 花生粕的研究及利用现状 8

1.5 本课题研究的意义 9

2 材料和方法 10

2.1 材料 10

2.1.1 供试材料 10

2.1.2 主要试剂 10

2.1.3 主要仪器 10

2.2 试验方法 11

2.2.1蛋白质含量测定 11

2.2.2 多肽测定 11

2.2.3水解度测定 12

2.2.4 Min Run Equirelicated Res IV设计(主效因子的筛选方法) 12

2.2.5爬陡坡实验 13

2.2.6 响应面法优化 13

2.2.7 验证实验 14

3 结果与分析 14

3.1Min Run Equirelicated Res IV设计 14

3.2 爬陡坡试验 15

3.3 响应面优化结果与分析 15

3.3.1数学模型的建立 15

3.3.2 模型方差分析 16

3.4降维分析 17

3.5 最佳条件的获得 19

3.6 验证试验 19

4 结论 19

参考文献 21

致谢 23

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