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食源性金黄色葡萄球菌感染性与耐药性的研究分析

www.bysj580.com / 2017-09-13
食源性金黄色葡萄球菌感染性与耐药性的研究分析
研究选题的基本原则:
 (1)科学性原则
 (2)需要性原则(适用性)
 (3)创新性原则
 (4)可行性原则
 (5)经济性原则
本课题的匹配度:
(1)高匹配:金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。而且金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37℃,最适生长pH 7.4。同时可以用动物试验、血清学试验、免疫荧光试验及酶联免疫吸附等方法检测出金黄色葡萄球菌肠毒素。可通过体内实验、体外实验等多种实验方法检测其对各类抗生素的耐药性。
(2)高匹配:美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大则更多,占45%,中国每年发生的此类中毒事件也非常多。其具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素红霉素等高度敏感。故研究其感染性与耐药性,可使大量感染病患得到及时优良的快速治疗,可降低其感染和病死率。
(3)高匹配:现已有部分关于金黄色葡萄球菌耐药性的相关研究,但并没有非常全面。随着时间的推移,临床滥用抗生素的现象对金黄色葡萄球菌的流行起着激发作用。比如,万古霉素是治疗MRSA(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)感染疗效肯定的糖肽类杀菌剂,它可与磷霉素、氨基糖苷类、利福平和夫西地酸等合用。临床上一直把它作为治疗MRSA感染的首选药物,但近年来已有MRSA对万古霉素敏感性降低的报道。故研究开发具有高度抗MRSA活性的新药,同时保护性使用现有的对MRSA有效的药物,成了临床非常棘手的难题之一。
(4)高匹配:主观上,现已有部分关于金黄色葡萄球菌的研究成果,利用已有的知识体系完全可以深度掌握了解其相关特性;通过相关小实验的操作与练习,我们已具备其基础的研究能力;通过食品卫生学、微生物学、生物化学等专业基础学科的学习对此课题理解深刻也有浓厚兴趣。客观上,研究需要查询的相关文献资料均可通过校内图书馆提供的查询资源进行查;药敏试验所使用试纸可直接购买,可自做培养基进行培养,用荧光分析仪器进行检测;不需要使用复杂昂贵的仪器,可充分利用已有条件完成试验。
(5)高匹配:该课题不需要购买昂贵仪器,不需要使用特殊化学试剂,不需要苛刻的研究环境。在自然界中的空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到原菌种。金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37℃,最适生长pH 7.4,可自行配置培养基进行培养,也可直接购买康泰生物科技有限公司提供的相关培养基。葡萄球菌肠毒素的测定,利用已有的酶联荧光免疫分析即可测定。培养后耐药性检测所需要抗生素种类多,但大部分属于常见价格较低,试验也不会耗费大量药品。
选择原因:从直觉思维、意外发现中选题
通过生物化学、微生物学、卫生学等专业课程的学习,我们对细菌及抗菌药物的抗菌机理等专业知识有了具体全面的了解掌握。但是学习课本知识终究是平面死板的,这使我没有很好的将知识融入生活的体验。今年开学初,有一位同学应血液感染金黄色葡萄球菌而患败血症。在该同学病症越来越重,痛苦日益增加的情形下,医院花费了大概十多天才确诊。这使我感到很不理解又很好奇,从而对金葡菌产生了浓厚兴趣。
我们生活中随处可见,甚至实验室里都能简单培养的菌种,却会在感染后给人体造成巨大伤害,甚至死亡。同时,医院用了十天来做各种检查来排除多种可能性,在其中十几管的血液培养中最终找到了源头。本以为既然已经知道了原因,对症下药很快就能治愈,毕竟我的学习理解中金葡菌只是小小的普通细菌,用相对的抗生素治疗很快就能解决问题。但是,该同学在医院用多种(最少五种不同抗生素)抗生素不同剂量尝试治疗了二十天,其中还做了一次穿刺引流的手术才得到康复修养。
通过这次经历,我发现了其中的可研究价值。虽然,金葡菌很常见,虽然我们都知道可以用抗生素灭菌。但是,不同的情况却需要不同的解决方案,随着生活中普遍的抗生素滥用现象,导致出现了不少具有耐药性的菌种。原本,最普通的抗生素就能杀灭的菌种,现在却需要不断研究更强效的抗生素进行治疗。甚至已经出现了耐多种抗生素的超级细菌。
所以此次选题,经过分析考虑后,我选择了研究食源性金黄色葡萄球菌的感染性与耐药性。
 
分析说明:
1、该课题研究成果来源:其中卫生检验杂志占重最大为34.6%,其次按比重依次为现代预防医学、实用预防医学、中国热带医学等。说明该课题研究对于医学免疫方面具有重大意义。
2、研究成果年分布:大致随着时间推移,人们对其研究越来越深入,研究成果越来越多。2016年几乎占从2006至2016十年间全部的四分之一,是占重最大的。说明该课题的研究不会随时间流逝而被泯灭,反而越来越具研究价值。
3、该课题研究机构分析:浙江省徐州市疾病预防中心、广西疾病预防控制中心、扬州大学、江苏省扬州市疾病预防中心和浙江省温州市疾病预防中心占了全部的一般。说明江浙一带对其研究能力比较强,整体研究水平高。
4、资金分布:非基金文献占全部研究成果道德84.6%,其次江苏省科技攻关计划占重最大,随后是各种国家基金。

实验方案: 
1、通过在自然环境如车站座位、绿化土壤、校内水源、食堂餐口等地方采样和通过医院临床收集大量金黄色葡萄球菌。
2、将收集到的菌种样品进行分类,选具有代表性和特异性的菌种进行培养。因金黄色葡萄球菌的培养条件简单,可自行制作(如,营养肉汤培养基)简单蛋白胨培养基,也可直接购买相关科技有限公司(如,康泰生物科技有限公司)的培养基。
    3、可采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因mecA和致病毒素基因中毒休克综合征毒素(TSST-1)、杀白细胞毒素(PVL),采用纸片扩散法进行药敏试验。采用K 2B 纸片扩散法,选用庆大霉素、青霉素、环丙沙星、氧氟沙星、阿莫西林、头孢噻肟、阿奇霉素等多种抗菌药物,对分离菌种进行各自的耐药性检测。
4、同时研究耐药性与菌种生物膜形成能力等相关因素的关系。可对分离的金黄色葡萄球菌进行药敏试验,采用刚果红平板法,定性检测生物膜粘附能力。从而探讨两者之间的关系。
 
 
 

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